Panel genetic pentru rahitism hipofosfatemic și displazii cu mineralizare anormală

Pe scurt

Testul citește aproape toate genele (secvențierea exomului) și le interpretează pentru bolile moștenite în care oasele și dinții nu se mineralizează normal (displazii cu mineralizare anormală), de exemplu rahitismul cauzat de fosfatul scăzut din sânge (rahitism hipofosfatemic) sau hipofosfatazia. Cuprinde toate cele 20 de gene cunoscute pentru aceste afecțiuni. Este pentru copiii și adulții cu rahitism, oase moi sau probleme ale dinților fără o cauză clară; medicul genetician stabilește, la consultație, dacă este testul potrivit.

Ce analizează

Testul citește, în aproape toate genele, porțiunile care conțin instrucțiunile pentru proteine (exonii, care împreună formează exomul), precum și ADN-ul mitocondrial. Interpretarea pornește de la afecțiunea pentru care se face testul: medicul genetician transmite semnele și istoricul familiei, iar raportul cuprinde variantele legate de această afecțiune, cu care persoana s-a născut, fie moștenite, fie apărute pentru prima dată la ea. Fiecare variantă se clasifică după criterii internaționale, de la fără efect (benignă) la cauzatoare de boală (patogenă). Separat, raportul poate cuprinde statutul de purtător pentru bolile recesive și descoperirile secundare din lista de gene ACMG: variante legate de alte afecțiuni, fără legătură cu motivul testării, pentru care există prevenție sau tratament. Le alegi la consimțământ, după discuția cu medicul genetician; pentru un copil, aleg părinții.

Exomul include toate cele 20 de gene cunoscute pentru afecțiune.

Ce raportează:

• schimbări ale unei singure „litere” din ADN (variante de un singur nucleotid, SNV), în toate genele care conțin instrucțiuni pentru proteine
• mici fragmente de ADN în plus sau lipsă (inserții și deleții mici, indeluri), în aceleași gene
• fragmente mai mari de ADN lipsă sau în plus (deleții și duplicații, CNV), pe care testul le vede doar în parte
• schimbări ale cromozomilor: un cromozom lipsă sau în plus (monosomii, trisomii), ambele copii ale unui cromozom moștenite de la același părinte (disomie uniparentală) sau un set întreg de cromozomi în plus (triploidie)
• variante ale ADN-ului mitocondrial
• variante cunoscute care cauzează boli, din afara porțiunilor care conțin instrucțiuni pentru proteine (variante necodante)
• o variantă de un singur nucleotid prezentă doar într-o parte dintre celule (mozaicism), de la o fracție alelică de peste 5%

Pentru cine este

• copil care începe să meargă și are picioare arcuite, creștere încetinită și fosfat scăzut în sânge;
• copil cu rahitism care nu se corectează cu vitamina D în doze obișnuite;
• abcese dentare apărute fără carii, la un copil sau adult cu fosfat scăzut;
• adult cu oase moi (osteomalacie), fracturi de stres, dureri osoase sau calcificări ale tendoanelor, fără cauză clară;
• fosfatază alcalină scăzută în sânge, cu pierderea timpurie a dinților de lapte sau fracturi.

Ce poate arăta rezultatul

• Pozitiv. Rezultatul numește boala, iar tratamentul diferă de la una la alta. Conform recomandărilor europene din 2019, rahitismul hipofosfatemic legat de X reprezintă aproximativ 80% din cazurile de rahitism hipofosfatemic. Pentru el și pentru hipofosfatazie există tratamente țintite, pe care le alege medicul specialist. Diagnosticul arată și cine din familie poate face testul țintit pentru varianta găsită.
• Negativ. Conform acelorași recomandări, la pacienții fără istoric familial, analiza genei PHEX lămurește diagnosticul în aproximativ 70–90% dintre cazuri, iar unele porțiuni mari lipsă (deleții mari) sau variantele prezente doar într-o parte dintre celule (mozaicismul) sunt greu de găsit. Un rezultat negativ nu exclude boala, mai ales când semnele sunt tipice. Dacă suspiciunea de cauză genetică rămâne, pasul următor pe care îl discutăm de obicei la consultație este secvențierea întregului genom (WGS).
• Variantă de semnificație incertă (VUS). O modificare despre care nu se știe încă dacă are vreun efect. Nu se folosește singură pentru decizii; analizele de sânge și testarea rudelor ajută la încadrare.

Ce nu poate detecta

• Testul nu este potrivit pentru modificările apărute doar într-o tumoră (variante somatice), pentru demență, bolile psihiatrice sau bolile neurodegenerative care încep târziu și nici pentru probe recoltate în sarcină (prenatale).
• Nu vede fragmentele de cromozom care și-au schimbat locul (translocațiile), moștenirea doar a unei porțiuni de cromozom de la un singur părinte (disomia uniparentală parțială), semnele chimice care pornesc sau opresc genele (metilarea), schimbul de secvență între gene foarte asemănătoare (conversiile genice), variantele prezente în foarte puține celule (mozaicism sub 5%) și variantele prezente într-o mică parte din ADN-ul mitocondrial (heteroplasmie sub 5%).
• Nu vede secvențele scurte repetate de prea multe ori (expansiunile de repetiții); pentru ele se face un test țintit.
• Interpretarea se sprijină pe informațiile clinice și pe istoricul familial transmise: dacă acestea sunt incomplete sau greșite, și interpretarea poate fi.
• Pe măsură ce bazele de date cu variante cresc, o variantă raportată poate fi reclasificată.
• O variantă poate să nu fie recunoscută drept cauza bolii, pentru că funcția unor gene și efectul unor variante nu sunt încă bine cunoscute.

Ca orice exom, testul nu vede sigur:

• majoritatea variantelor din afara exonilor, de exemplu din regiunile care reglează genele;
• unele porțiuni lipsă sau în plus (deleții și duplicații), mai ales cele mici, de un singur exon;
• genele cu „copii” aproape identice în altă parte a genomului;
• de obicei, dacă și când vor apărea semnele sau cât de severe vor fi: aceeași variantă se poate manifesta diferit în aceeași familie.

Cum se face

Proba poate fi un frotiu bucal (de pe interiorul obrazului), sânge, câteva picături de sânge uscate pe un card (DBS), salivă sau ADN deja extras într-un laborator calificat. Rezultatul este gata în aproximativ 20 de zile lucrătoare de la primirea probei în laborator. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: secvențierea exomului prin secvențiere de nouă generație (NGS), după îmbogățirea exonilor genelor care codifică proteine și a ADN-ului mitocondrial; acoperire medie de cel puțin 100×, cu 99,7% din regiunile țintă acoperite de cel puțin 20 de ori; raportul cuprinde variantele legate de indicația pentru care s-a cerut testul
• Variante raportate: variante de un singur nucleotid (SNV), în toate genele care codifică proteine; mici inserții și deleții (indeluri), în toate genele care codifică proteine; deleții și duplicații mai mari (CNV), cu detecție limitată; anomalii cromozomiale: monosomii, trisomii, disomie uniparentală, triploidie; variante ale ADN-ului mitocondrial; variante necodante cunoscute ca producătoare de boală; mozaicism pentru variantele de un singur nucleotid, de la o fracție alelică de peste 5%
• Gene (20)

  • ALPL
  • ANKH
  • AP2S1
  • CASR
  • CLCN5
  • CYP27B1
  • CYP2R1
  • CYP3A4
  • DMP1
  • ENPP1
  • FAM20C
  • FGF23
  • OCRL
  • PHEX
  • PTH1R
  • SLC2A2
  • SLC34A1
  • SLC34A3
  • TRPV6
  • VDR
• Probă: frotiu bucal, sânge, picătură de sânge uscată pe card (DBS), salivă sau ADN deja extras într-un laborator calificat
• Durată: 20 de zile lucrătoare

Context clinic

• Analizele care preced testul genetic: fosfatul, calciul, fosfataza alcalină, parathormonul, vitamina D, fosfatul urinar și, la nevoie, FGF23.
• Tratamentele țintite: în hipofosfatemia legată de X, un anticorp împotriva FGF23 (burosumab, conform GeneReviews); în hipofosfatazie, terapia de înlocuire enzimatică.
• Diagnosticul diferențial, în afara listei de gene a testului: osteomalacia indusă de o tumoră care secretă FGF23; sindromul Fanconi renal (HT-0449).