Detecția prin FISH a amplificării HER2 pe țesut tumoral

Pe scurt

Testul numără, cu sonde fluorescente văzute la microscop (FISH), copiile genei HER2 (numită și ERBB2) din celulele unei tumori, pe țesutul deja recoltat la biopsie sau la operație. Se folosește mai ales în cancerul de sân și în cancerul gastric sau al joncțiunii eso-gastrice, când primul test HER2, făcut de anatomopatolog pe proteină, a dat un rezultat la limită (2+). Rezultatul arată dacă tumora este HER2-pozitivă, adică dacă un tratament țintit pe HER2 este o opțiune de discutat cu medicul oncolog.

Ce analizează

Gena HER2 produce un receptor care transmite celulei semnale de creștere. În unele tumori, gena este amplificată: celula are mult mai multe copii decât în mod normal, iar receptorul apare în exces la suprafața ei.

FISH înseamnă hibridizare in situ fluorescentă. Pe o secțiune subțire din tumoră se aplică sonde care strălucesc în culori diferite: de obicei una se leagă de gena HER2, iar cealaltă de centrul cromozomului 17 (CEP17), cromozomul pe care se află gena. Specialistul numără la microscop semnalele din nucleele celulelor tumorale; cu o sondă dublă se calculează două valori: raportul dintre semnalele HER2 și CEP17 și numărul mediu de copii HER2 pe celulă.

Pentru cine este

• cancer de sân invaziv cu un scor HER2 la limită (2+, echivoc) la primul test;
• cancer gastric sau al joncțiunii eso-gastrice avansat, cu un scor HER2 2+;
• rezultat HER2 discordant între biopsie și piesa operatorie;
• recidivă sau metastază la care oncologul vrea retestarea HER2 pe țesutul nou.

Ce poate arăta rezultatul

• HER2 amplificat (pozitiv). În cancerul de sân, conform ghidului ASCO/CAP din 2018, rezultatul este pozitiv când raportul HER2/CEP17 este de cel puțin 2,0 și numărul mediu de copii HER2 este de cel puțin 4 pe celulă. Tumora poate răspunde la tratamentul țintit pe HER2, pe care îl discută medicul oncolog.
• HER2 neamplificat (negativ). Tratamentul țintit clasic pe HER2 nu se alege pe baza acestui rezultat. În cancerul de sân, o tumoră fără amplificare, dar cu scor 1+ sau 2+, poate avea totuși o opțiune de tratament mai nouă; conform actualizării ASCO/CAP din 2023, aici contează scorul de la primul test.
• Tipare mai rare. Unele combinații de valori se interpretează împreună cu scorul de la primul test, iar concluzia finală este pozitivă sau negativă.

În cancerul gastric, conform ghidului CAP/ASCP/ASCO, FISH-ul urmează doar după un scor 2+.

Ce nu poate detecta

• Nivelul proteinei HER2 (scorul 0, 1+, 2+ sau 3+), care se stabilește prin primul test, făcut de anatomopatolog.
• Mutațiile genei HER2, relevante în alte tumori, de exemplu în cancerul pulmonar.
• Amplificarea prezentă doar într-o parte a tumorii, dacă zona analizată nu o cuprinde.
• Alte gene sau alți biomarkeri ai tumorii.
• Un risc moștenit de cancer: amplificarea HER2 apare doar în celulele tumorii.

Cum se face

De obicei nu e nevoie de o recoltare nouă: se folosește blocul de parafină din biopsie sau din operație, păstrat de serviciul de anatomie patologică, împreună cu buletinul histopatologic și rezultatul primului test HER2. Se pot trimite și lame necolorate. Rezultatul vine, de obicei, în 14 zile lucrătoare de la primirea probei în laborator. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• Variante raportate: amplificarea genei HER2
• Probă: țesut fixat în formol și inclus în parafină (bloc FFPE) sau lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă)
• Durată: 14 zile lucrătoare

Context clinic

• Algoritmul ASCO/CAP: imunohistochimia HER2 este primul test, iar ISH (FISH) urmează la un scor 2+ (echivoc). În cancerul gastric, conform CAP/ASCP/ASCO, imunohistochimia se face întâi, iar FISH-ul doar după un rezultat 2+.
• Sân, ASCO/CAP 2018: grupurile ISH 2–4 (de exemplu un raport HER2/CEP17 de cel puțin 2,0 cu sub 4 copii pe celulă) se interpretează împreună cu imunohistochimia, iar concluzia finală este pozitivă sau negativă.
• Sân, ASCO/CAP 2023: o tumoră fără amplificare, cu imunohistochimie 1+ sau 2+, poate fi eligibilă pentru un anticorp conjugat anti-HER2; distincția dintre scorurile 0 și 1+ a devenit importantă.