Detecția prin FISH a anomaliilor numerice ale cromozomului 8

Pe scurt

Testul numără, printr-o analiză la microscop cu sonde fluorescente (FISH), copiile cromozomului 8, de obicei în celulele din măduva osoasă. Caută mai ales trisomia 8, adică o copie în plus a cromozomului 8, una dintre modificările frecvente în bolile măduvei, de exemplu în sindroamele mielodisplazice (SMD) și în leucemiile mieloide. Se face la indicația medicului hematolog.

Ce analizează

O celulă sănătoasă are două copii din fiecare cromozom. În unele boli ale măduvei, celulele bolnave câștigă sau pierd un cromozom întreg. Conform National Cancer Institute, aproximativ jumătate dintre pacienții cu SMD au o modificare a cromozomilor, iar trisomia 8 este printre cele mai frecvente.

Testul folosește un mic fragment de ADN marcat cu o culoare fluorescentă (sondă), care se atașează de centrul cromozomului 8 (centromerul); metoda se numește hibridizare fluorescentă in situ (FISH). La microscop se numără punctele colorate din fiecare nucleu: două puncte înseamnă două copii, trei înseamnă trisomie, unul singur înseamnă o pierdere. Analiza se face pe nuclee, fără să fie nevoie de celule care se divid în cultură, ca la cariotip.

Pentru cine este

• persoană cu suspiciune sau diagnostic de sindrom mielodisplazic (SMD), la care analiza cromozomilor din măduvă (cariotipul) nu a reușit sau a avut prea puține celule analizabile;
• persoană cu o trisomie 8 cunoscută, la care medicul hematolog vrea să urmărească proporția de celule cu această modificare;
• persoană cu leucemie mieloidă cronică sau acută, când medicul vrea să afle dacă există o copie în plus a cromozomului 8;
• persoană cu valori scăzute neexplicate ale celulelor sângelui (citopenii), investigată de medicul hematolog.

Ce poate arăta rezultatul

• Trisomie 8: o parte dintre nucleele analizate au trei copii ale cromozomului 8. În SMD, trisomia 8 ca modificare unică intră în grupa de risc citogenetic intermediar. În leucemia mieloidă cronică, ghidul ELN din 2020 o numără printre modificările suplimentare cu risc înalt și recomandă ca pacienții cu astfel de modificări să fie tratați ca pacienți cu risc înalt.
• Alt număr de copii: mai rar, patru copii (tetrasomie) sau o singură copie (monosomie) a cromozomului 8.
• Normal: două copii în nucleele analizate.
• Neconcludent: prea puține celule sau semnale greu de citit; se poate cere o probă nouă.

Trisomia 8 singură nu pune un diagnostic: se interpretează împreună cu hemograma, examenul măduvei la microscop și celelalte teste genetice. Rar, trisomia 8 este prezentă din naștere, în mozaic, adică doar într-o parte dintre celulele corpului, și în alte țesuturi decât sângele. Dacă medicul se gândește la această situație, poate cere un test din alt țesut. La consultație îți explicăm ce înseamnă rezultatul în cazul tău.

Ce nu poate detecta

• rearanjamentele unor gene anume de pe cromozomul 8, de exemplu MYC, RUNX1T1 sau FGFR1, care se caută cu sonde pentru acele gene;
• modificările altor cromozomi;
• schimbările din interiorul genelor (mutațiile), care se caută prin secvențiere;
• modificările prezente doar într-un grup prea mic de celule (clonă), sub pragul de detecție al metodei.

Cum se face

Testul se face pe măduvă osoasă sau pe sânge periferic, recoltate pe heparină de litiu; se pot trimite și celule fixate, lame necolorate sau țesut inclus în parafină (FFPE). În bolile măduvei, proba obișnuită este aspiratul de măduvă, recoltat de medicul hematolog prin puncție medulară; la consultație îți explicăm cum se trimite. Rezultatul vine, de obicei, în 9 zile lucrătoare de la primirea probei în laborator. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH) cu sondă centromerică pentru cromozomul 8
• Variante raportate: anomalii numerice ale cromozomului 8; modificări structurale care implică cromozomul 8
• Probă: sânge periferic recoltat pe heparină de litiu (cel puțin 3 ml), măduvă osoasă recoltată pe heparină de litiu (cel puțin 1 ml), suspensie de celule fixate (un tub pentru fiecare cultură), lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă) sau țesut fixat în formol și inclus în parafină (FFPE; bloc sau 4–6 secțiuni)
• Durată: 9 zile lucrătoare