Detecția prin FISH a rearanjamentelor IGH (14q32)

Pe scurt

Testul caută, printr-o analiză la microscop cu sonde fluorescente (FISH), o rupere în regiunea IGH de pe cromozomul 14 (14q32), unde se află genele pentru lanțurile grele ale anticorpilor. Se face pe celulele bolii, din măduva osoasă, din sânge sau dintr-o biopsie, la persoanele cu mielom multiplu ori cu o altă boală a limfocitelor B. Testul arată dacă există o translocație care implică IGH; partenerul exact se află, la nevoie, cu teste țintite.

Ce analizează

Testul folosește fragmente scurte de ADN marcate cu o culoare fluorescentă (sonde), care se lipesc de o regiune precisă a unui cromozom; metoda se numește hibridizare fluorescentă in situ (FISH). La microscop, fiecare regiune marcată apare ca un punct colorat, iar specialistul urmărește aceste puncte în multe celule, una câte una.

În limfocitele B și în plasmocite (celulele care produc anticorpi), regiunea IGH este foarte activă, pentru că acolo se produc anticorpii. Dacă o genă care controlează creșterea celulei ajunge, printr-o translocație, lângă IGH, ea devine și ea foarte activă. Testul arată dacă regiunea IGH s-a rupt.

Pentru cine este

• persoană cu mielom multiplu nou diagnosticat, pentru stabilirea profilului genetic al plasmocitelor;
• persoană cu mielom multiplu, la o recădere evidentă;
• persoană cu limfom cu celule B, de exemplu limfom de manta sau limfom folicular, la care medicul anatomopatolog are nevoie de un argument genetic;
• persoană cu leucemie limfocitară cronică sau cu altă boală a limfocitelor B, când medicul hematolog vrea să afle dacă există o translocație IGH.

Ce poate arăta rezultatul

• Rearanjament IGH prezent. Celulele bolii au o translocație care implică IGH. Contează însă și care este partenerul: în mielom, conform consensului IMS/IMWG din 2025, translocațiile t(4;14), t(14;16) și t(14;20) sunt considerate criterii de risc înalt atunci când apar împreună cu un câștig de 1q sau o pierdere de 1p32. De aceea, după un rezultat pozitiv se folosesc, de regulă, sonde pentru partenerii posibili.
• Rearanjament absent. Regiunea IGH nu apare ruptă în celulele analizate. Boala poate avea alte modificări genetice, de exemplu pierderi sau câștiguri de cromozomi, care se caută prin alte teste.
• Rezultat atipic. Uneori apare un tipar neobișnuit al semnalelor. La consultație îți explicăm ce înseamnă și dacă e nevoie de un test complementar.

Ce nu poate detecta

• pierderile sau câștigurile altor regiuni importante în mielom, de exemplu 17p, 1q sau 13q;
• schimbările din interiorul genelor (mutațiile), care se caută prin secvențiere;
• unele modificări relevante, care pot rămâne neidentificate din cauza limitelor actuale ale tehnologiei sau ale cunoștințelor medicale; uneori, rezultatul nu este concludent;
• riscul moștenit de cancer: testul privește celulele bolii, nu ADN-ul cu care te-ai născut.

Cum se face

Proba poate fi măduvă osoasă extrasă cu un ac (aspirat de măduvă, cel puțin 1 ml), recoltată de medicul hematolog, sau sânge din venă (sânge periferic, cel puțin 3 ml), ambele pe heparină de litiu, ori blocul de parafină cu țesutul din biopsie sau 4–6 secțiuni din el, păstrate de laboratorul de anatomie patologică. Se pot folosi și lame citogenetice necolorate sau o suspensie de celule fixate. În mielom, European Myeloma Network recomandă ca proba pentru FISH să provină din prima seringă a aspiratului. Rezultatul vine, de obicei, în 9 zile lucrătoare de la primirea probei în laborator. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• Variante raportate: rearanjamentele genei IGH (regiunea 14q32)
• Probă: sânge periferic recoltat pe heparină de litiu (cel puțin 3 ml), măduvă osoasă recoltată pe heparină de litiu (cel puțin 1 ml), suspensie de celule fixate (un tub pentru fiecare cultură), lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă) sau țesut fixat în formol și inclus în parafină (FFPE; bloc sau 4–6 secțiuni)
• Durată: 9 zile lucrătoare