Panel FISH pentru limfom difuz cu celule B mari

Pe scurt

Panelul caută, printr-o analiză la microscop cu sonde fluorescente (FISH), în celulele unui limfom difuz cu celule B mari, trei modificări: translocația t(14;18), care implică gena BCL2, translocația t(8;14), care implică gena MYC, și rearanjamentele genei BCL6. Rezultatul ajută la încadrarea exactă a limfomului, pentru că unele combinații de rearanjamente definesc o formă separată în clasificarea actuală. Testul se face pe o probă de sânge sau de măduvă osoasă și se alege împreună cu medicul hematolog, anatomopatologul și medicul genetician.

Ce analizează

Testul folosește fragmente mici de ADN marcate cu culori fluorescente (sonde), care se lipesc de anumite gene; metoda se numește hibridizare fluorescentă in situ (FISH). La microscop, specialistul vede dacă o genă și-a schimbat locul și s-a lipit de alta, adică dacă a apărut un rearanjament (o translocație).

Panelul caută trei astfel de modificări:

• t(14;18), care leagă gena BCL2 de gena IGH;
• t(8;14), care leagă gena MYC de gena IGH;
• rearanjamentele genei BCL6.

Modificările apar în celulele limfomului, nu se moștenesc și nu se găsesc în restul corpului.

Pentru cine este

• persoană cu limfom difuz cu celule B mari nou diagnosticat pe biopsie, la care medicul anatomopatolog și medicul hematolog vor să afle dacă genele MYC, BCL2 și BCL6 sunt rearanjate;
• persoană cu un limfom cu celule B mari cu aspect de grad înalt la microscop, greu de încadrat;
• persoană cu limfom cu celule B mari la care biopsia de măduvă arată celule de limfom, când țesutul din ganglion nu mai este disponibil pentru analiză.

Ce poate arăta rezultatul

Rearanjament MYC împreună cu rearanjament BCL2. Conform clasificării OMS din 2022, aceste cazuri formează o categorie separată: limfom difuz cu celule B mari sau limfom cu celule B de grad înalt, cu rearanjamente MYC și BCL2. Este o formă cu evoluție de obicei mai agresivă, iar medicul hematolog poate discuta un alt tratament.

Rearanjament MYC împreună cu BCL6. Tot conform OMS din 2022, aceste cazuri nu mai fac parte din categoria de mai sus și se încadrează ca limfom difuz cu celule B mari sau limfom de grad înalt fără altă specificare.

Un singur rearanjament sau niciunul. Limfomul nu intră în categoria cu rearanjamente MYC și BCL2. Încadrarea finală se face după aspectul la microscop și după celelalte analize.

Rezultat neinformativ. Uneori, proba nu permite o analiză corectă și e nevoie de altă probă.

Ce nu poate detecta

• rearanjamentele MYC sau BCL2 cu alți parteneri decât IGH, dacă se folosesc doar sondele de fuziune pentru t(8;14) și t(14;18);
• schimbările mici din interiorul genelor (mutațiile punctiforme) și alte modificări care nu schimbă locul genelor;
• subtipul celular al limfomului (centru germinativ sau celulă B activată), care se stabilește prin alte analize ale biopsiei;
• rearanjamentele din celule prea puține în proba analizată.

Cum se face

Testul se face pe sânge periferic sau pe măduvă osoasă, recoltate pe heparină de litiu, ori pe celule fixate sau lame necolorate. Dacă se poate folosi și blocul de parafină din biopsia ganglionară, confirmăm cu laboratorul înainte de trimitere; la consultație îți explicăm ce probă se trimite. Rezultatul vine, de obicei, în 11 zile lucrătoare de la primirea probei. Prețul include consultația de genetică medicală dinainte de test, interpretarea rezultatului și consultația de după.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• Variante raportate: translocația t(14;18); translocația t(8;14); rearanjamente ale genei BCL6 (regiunea 3q27-28)
• Probă: sânge periferic recoltat pe heparină de litiu (cel puțin 3 ml), măduvă osoasă recoltată pe heparină de litiu (cel puțin 1 ml), suspensie de celule fixate (un tub pentru fiecare cultură) sau lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă)
• Durată: 11 zile lucrătoare

Context clinic

• t(8;14) este caracteristică limfomului Burkitt, principalul diagnostic diferențial al unui limfom cu celule B cu aspect de grad înalt; t(8;14) apare însă și în limfomul difuz cu celule B mari.
• Subtipul celular (centru germinativ sau celulă B activată) se stabilește prin imunohistochimie sau prin alte teste.