Detecția prin FISH a deleției 7q31

Pe scurt

Testul verifică, printr-o analiză la microscop cu sonde fluorescente (FISH), dacă regiunea 7q31 a cromozomului 7 lipsește din celulele măduvei osoase. Pierderea cromozomului 7 sau a unei porțiuni din brațul lui lung (deleția 7q) apare în sindroamele mielodisplazice (boli în care măduva produce celule de sânge care nu se maturizează corect) și în leucemia acută mieloidă, la adulți și la copii, și contează pentru estimarea riscului și alegerea tratamentului. Medicul hematolog îl cere mai ales când cariotipul nu a dat rezultat sau pentru a urmări o modificare cunoscută.

Ce analizează

Testul folosește un fragment scurt de ADN marcat cu o substanță fluorescentă (sondă), care se lipește doar de regiunea căutată; metoda se numește hibridizare fluorescentă in situ (FISH). La microscop, fiecare copie a regiunii 7q31 apare ca un punct luminos: o celulă normală are două, o celulă cu deleție sau fără un cromozom 7 are unul. Analiza se face pe nucleii celulelor care nu se divid, deci dă un răspuns și atunci când cariotipul eșuează.

Conform recomandărilor European LeukemiaNet (ELN) pentru sindroamele mielodisplazice, monosomia 7 și deleția 7q sunt printre cele mai frecvente modificări cromozomiale izolate în această boală, iar FISH se recomandă când cariotipul eșuează în mod repetat.

Pentru cine este

• persoană cu suspiciune de sindrom mielodisplazic, la care cariotipul din măduvă nu a avut celule în diviziune sau a avut prea puține;
• persoană cu leucemie acută mieloidă, la care cariotipul a eșuat și medicul hematolog vrea să verifice cromozomul 7;
• copil cu sindrom mielodisplazic sau cu scăderea persistentă a valorilor din hemogramă, la indicația medicului hematolog;
• persoană cu o boală mieloidă cu pierderea cromozomului 7 (monosomie 7) sau cu deleție 7q cunoscută, pentru urmărirea ei după tratament sau după transplant.

Ce poate arăta rezultatul

• Pierdere prezentă. Raportul dă procentul de celule cu un singur semnal. În scorul IPSS-R pentru sindroamele mielodisplazice, deleția 7q face parte din grupul de risc citogenetic intermediar, iar monosomia 7 din grupul de risc slab. În clasificarea OMS din 2022, monosomia 7 și deleția 7q sunt printre modificările care definesc leucemia acută mieloidă cu modificări legate de mielodisplazie; la copiii cu sindrom mielodisplazic, ele se asociază cu un risc mai mare de evoluție spre leucemie acută.
• Pierdere absentă. Regiunea 7q31 este prezentă în ambele copii în celulele analizate.
• Rezultat la limită. Când procentul de celule cu modificarea este apropiat de pragul laboratorului, rezultatul se interpretează împreună cu celelalte analize și, uneori, testul se repetă.

Rezultatul nu decide singur tratamentul: medicul hematolog îl citește împreună cu hemograma, aspectul măduvei și celelalte teste.

Ce nu poate detecta

• Deosebirea dintre monosomia 7 și deleția 7q, dacă testul nu are și o sondă de control pentru cromozomul 7.
• O deleție 7q care nu cuprinde regiunea 7q31.
• Modificările altor cromozomi și translocațiile, pe care le vede cariotipul complet.
• Schimbările din interiorul genelor (mutațiile), de exemplu din RUNX1 sau TP53, care se caută prin secvențierea mai multor gene deodată (panelul NGS pentru neoplasme mieloide).
• O pierdere prezentă într-un procent de celule sub pragul laboratorului.

Cum se face

Proba este, de regulă, măduvă osoasă extrasă cu un ac (aspirat de măduvă, cel puțin 1 ml, pe heparină de litiu). O recoltează medicul hematolog, prin puncție-aspirație medulară, cu anestezie, adesea în aceeași ședință cu celelalte analize ale măduvei. Laboratorul acceptă și sânge din venă (sânge periferic, cel puțin 3 ml, pe heparină de litiu), celule fixate, lame necolorate sau țesut inclus în parafină (FFPE). Rezultatul vine, de obicei, în 9 zile lucrătoare de la primirea probei. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• Variante raportate: deleția regiunii 7q31
• Probă: sânge periferic pe heparină de litiu (cel puțin 3 ml), măduvă osoasă pe heparină de litiu (cel puțin 1 ml), suspensie de celule fixate (un tub pentru fiecare cultură), lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă) sau țesut fixat în formol și inclus în parafină (bloc FFPE sau 4–6 secțiuni)
• Durată: 9 zile lucrătoare

Context clinic

• Monosomia 7 la copil: clasificarea OMS din 2022 recunoaște neoplasmele mieloide cu predispoziție germinală, de exemplu prin variante GATA2 sau SAMD9/SAMD9L. Testul germinal se face pe ADN dintr-o probă fără celule hematopoietice (de exemplu fibroblaști din piele), iar rezultatul contează și pentru alegerea donatorului din familie.