Detecția prin FISH a rearanjamentelor BCL6 (3q27)

Pe scurt

Testul caută, printr-o analiză la microscop cu sonde fluorescente (FISH), dacă gena BCL6, aflată pe cromozomul 3, în regiunea 3q27, s-a rupt și s-a lipit de o regiune de pe alt cromozom (rearanjament). Se face pe celulele bolii, dintr-o biopsie, din măduva osoasă sau din sânge, la persoanele cu un limfom cu celule B suspectat sau deja diagnosticat, cel mai des un limfom difuz cu celule B mari. Rezultatul ajută medicul hematolog și anatomopatologul să încadreze exact limfomul.

Ce analizează

Testul folosește fragmente scurte de ADN marcate cu o culoare fluorescentă (sonde), care se lipesc de o regiune precisă a unui cromozom; metoda se numește hibridizare fluorescentă in situ (FISH). La microscop, fiecare regiune marcată apare ca un punct colorat, iar specialistul numără și urmărește aceste puncte în multe celule, una câte una.

Gena BCL6 controlează maturarea limfocitelor B în ganglioni. Când se rupe și ajunge lângă o genă foarte activă, adesea una dintre genele anticorpilor (imunoglobulinelor), rămâne pornită și favorizează creșterea limfomului. Testul arată dacă gena BCL6 s-a rupt și și-a schimbat locul.

Pentru cine este

• persoană cu limfom difuz cu celule B mari, la diagnostic, când se verifică genele MYC, BCL2 și BCL6;
• persoană cu un limfom cu celule B cu evoluție agresivă, numit „de grad înalt”, a cărui încadrare depinde de genele rearanjate;
• persoană cu alt limfom cu celule B, la care medicul anatomopatolog are nevoie de o informație genetică suplimentară pentru diagnostic;
• un rezultat neclar la alt test al tumorii, care trebuie confirmat.

Ce poate arăta rezultatul

• Rearanjament BCL6 prezent. Gena BCL6 apare ruptă în celulele analizate. Rezultatul se citește împreună cu testele pentru MYC și BCL2: conform clasificării Organizației Mondiale a Sănătății din 2022, limfoamele cu MYC și BCL6 rearanjate, fără BCL2, nu mai formează o categorie aparte și se încadrează ca limfom difuz cu celule B mari sau limfom B de grad înalt, fără altă specificare.
• Rearanjament absent. Gena BCL6 nu apare ruptă în celulele analizate. Limfomul poate avea însă alte modificări genetice, care se caută prin alte teste.
• Rezultat atipic. Uneori apar copii în plus ale regiunii sau un tipar neobișnuit al semnalelor. La consultație îți explicăm ce înseamnă și dacă e nevoie de un test complementar.

Ce nu poate detecta

• schimbările mici din interiorul genei (mutațiile);
• modificările altor gene, de exemplu MYC sau BCL2, care au teste separate;
• unele modificări relevante, care pot rămâne neidentificate din cauza limitelor actuale ale tehnologiei sau ale cunoștințelor medicale; uneori, rezultatul nu este concludent;
• riscul moștenit de cancer: testul privește celulele limfomului, nu ADN-ul cu care te-ai născut.

Cum se face

Testul se poate face pe o probă recoltată deja pentru diagnostic: blocul de parafină cu țesutul din biopsie sau 4–6 secțiuni din el, păstrate de laboratorul de anatomie patologică. Se pot folosi și măduvă osoasă (cel puțin 1 ml) sau sânge periferic (cel puțin 3 ml), recoltate pe heparină de litiu, ori lame citogenetice necolorate sau o suspensie de celule fixate. Medicul genetician îți cere înainte rezultatul analizei la microscop a țesutului (raportul histopatologic) și rezultatele analizelor făcute până atunci. Rezultatul vine, de obicei, în 9 zile lucrătoare de la primirea probei în laborator. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• Variante raportate: rearanjamentele genei BCL6 (regiunea 3q27)
• Probă: sânge periferic recoltat pe heparină de litiu (cel puțin 3 ml), măduvă osoasă recoltată pe heparină de litiu (cel puțin 1 ml), suspensie de celule fixate (un tub pentru fiecare cultură), lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă) sau țesut fixat în formol și inclus în parafină (FFPE; bloc sau 4–6 secțiuni)
• Durată: 9 zile lucrătoare