Detecția prin FISH a rearanjamentelor BCL2 (18q21)

Pe scurt

Testul verifică, printr-o analiză la microscop cu sonde fluorescente (FISH), dacă gena BCL2, aflată pe cromozomul 18 (regiunea 18q21), s-a rupt și s-a lipit de o altă genă în celulele unui limfom. Această modificare, numită rearanjament, este tipică pentru limfomul folicular și apare și în unele limfoame agresive cu celule B mari. Se poate face pe țesutul din biopsie, pe măduvă osoasă sau pe sânge, la cererea medicului hematolog sau a medicului anatomopatolog.

Ce analizează

Gena BCL2 frânează moartea programată a celulelor. Când un rearanjament o mută lângă o genă foarte activă, de cele mai multe ori gena IGH de pe cromozomul 14, în translocația t(14;18), limfocitele trăiesc mai mult decât ar trebui și se acumulează.

Testul folosește fragmente scurte de ADN marcate cu substanțe fluorescente (sonde), care se lipesc de regiunea genei BCL2; metoda se numește hibridizare fluorescentă in situ (FISH). La microscop, poziția semnalelor arată dacă gena este întreagă sau dacă s-a rupt și a ajuns lângă o altă genă. Analiza se face pe nucleii celulelor, pe secțiunile din blocul de parafină sau pe celulele din măduvă ori din sânge.

Pentru cine este

• persoană cu suspiciune de limfom folicular, la care medicul anatomopatolog are nevoie de un argument genetic pentru diagnostic;
• persoană cu limfom difuz cu celule B mari sau cu limfom cu celule B de grad înalt, ca parte a verificării rearanjamentelor MYC și BCL2;
• persoană cu un limfom care pare să se fi transformat într-o formă mai agresivă;
• persoană cu un limfom care a ajuns în măduva osoasă, când medicul hematolog cere analiza din aspiratul de măduvă.

Ce poate arăta rezultatul

• Rearanjament prezent. Gena BCL2 este ruptă într-o parte din celulele analizate. Conform clasificării OMS din 2022, majoritatea limfoamelor foliculare, în forma lor clasică, au translocația t(14;18) cu fuziunea IGH::BCL2. Când apare împreună cu un rearanjament MYC, într-un limfom agresiv, rezultatul încadrează boala într-o categorie aparte, cea a limfoamelor cu rearanjamente MYC și BCL2.
• Rearanjament absent. Gena BCL2 nu este ruptă în celulele analizate. Nu exclude limfomul folicular: nu toate limfoamele foliculare au această translocație.
• Rezultat neinterpretabil. Uneori țesutul are prea puține celule tumorale sau a fost deteriorat la procesare.

Diagnosticul îl pune medicul anatomopatolog, împreună cu aspectul la microscop și celelalte analize ale țesutului; FISH este una dintre piese.

Ce nu poate detecta

• Rearanjamentele genelor MYC și BCL6, care se analizează cu alte sonde.
• Partenerul exact al genei BCL2, dacă testul folosește o sondă care arată doar ruperea genei.
• Cantitatea de proteină BCL2 din celule, analizată separat pe țesut, și schimbările mici din interiorul genei (mutațiile punctiforme).
• Unele modificări relevante: limitele actuale ale tehnologiei sau ale cunoștințelor medicale pot face ca ele să nu fie identificate, iar uneori rezultatul nu este concludent.
• Riscul moștenit de boală: modificarea apare doar în celulele limfomului.

Cum se face

Testul se poate face pe blocul de parafină din biopsia deja făcută sau pe 4–6 secțiuni din el, pe care le ceri de la serviciul de anatomie patologică unde a fost analizată biopsia. Se pot folosi și măduvă osoasă (cel puțin 1 ml) sau sânge periferic (cel puțin 3 ml), recoltate pe heparină de litiu, ori lame citogenetice necolorate sau o suspensie de celule fixate. Rezultatul vine, de obicei, în 9 zile lucrătoare de la primirea probei. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• Variante raportate: rearanjamentele genei BCL2 (regiunea 18q21)
• Probă: sânge periferic recoltat pe heparină de litiu (cel puțin 3 ml), măduvă osoasă recoltată pe heparină de litiu (cel puțin 1 ml), suspensie de celule fixate (un tub pentru fiecare cultură), lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă) sau țesut fixat în formol și inclus în parafină (FFPE; bloc sau 4–6 secțiuni)
• Durată: 9 zile lucrătoare

Context clinic

• FISH-ul completează morfologia și imunohistochimia, inclusiv expresia proteinei BCL2; nu le înlocuiește.