Panel FISH pentru leucemie limfocitară cronică (13q-, 11q-, 17p-, +12, IGH)

Pe scurt

Panelul caută, printr-o analiză la microscop cu sonde fluorescente (FISH), cele patru modificări ale cromozomilor cu valoare de prognostic în leucemia limfocitară cronică (LLC): pierderile 13q, 11q și 17p și copia în plus a cromozomului 12. A cincea sondă caută translocațiile care implică regiunea IGH, utile când diagnosticul trebuie deosebit de alte limfoame. Se face de obicei din sânge, la indicația medicului hematolog.

Ce analizează

LLC pornește din limfocitele B, celulele care produc anticorpi. O celulă sănătoasă are două copii din fiecare cromozom; în celulele de LLC, unele porțiuni se pierd sau apar în plus.

Testul folosește mici fragmente de ADN marcate cu o culoare fluorescentă (sonde), care se atașează de regiuni precise; metoda se numește hibridizare fluorescentă in situ (FISH). La microscop se numără punctele colorate din fiecare nucleu. Panelul are cinci sonde:

• 13q: pierderea unei porțiuni din brațul lung al cromozomului 13, cea mai frecventă modificare în LLC;
• 11q: pierderea unei porțiuni din brațul lung al cromozomului 11, unde se află gena ATM;
• 17p: pierderea unei porțiuni din brațul scurt al cromozomului 17, unde se află gena TP53, importantă pentru alegerea tratamentului;
• cromozomul 12: o copie în plus (trisomia 12);
• IGH (14q32): translocațiile care implică regiunea genelor de anticorpi, rare în LLC și mai frecvente în alte limfoame cu celule B.

Conform National Cancer Institute, deleția 13q singură are prognosticul cel mai favorabil, trisomia 12 și deleția 11q au un prognostic mai puțin favorabil, iar deleția 17p pe cel mai puțin favorabil.

Pentru cine este

• persoană cu LLC care urmează să înceapă primul tratament;
• persoană cu LLC la recădere sau progresie, înaintea unui nou tratament;
• persoană cu limfocite B crescute la care medicul vrea să deosebească LLC de alte limfoame;
• persoană cu LLC fără indicație de tratament, când medicul hematolog vrea o estimare a evoluției.

Ce poate arăta rezultatul

• Deleția 17p: se asociază, conform National Cancer Institute, cu variante ale genei TP53 și cu răspunsuri mai slabe și mai scurte la tratamentele standard. Rezultatul cântărește mult la alegerea tratamentului.
• Deleția 11q sau trisomia 12: un prognostic mai puțin favorabil decât deleția 13q singură.
• Deleția 13q singură: cel mai favorabil profil dintre cele analizate.
• Translocație care implică IGH: poate sugera o translocație specifică altui limfom; se discută împreună cu analiza markerilor de pe suprafața celulelor (imunofenotipul), iar medicul poate cere teste suplimentare.
• Fără modificări în regiunile analizate sau neconcludent, când celulele au fost prea puține.

Un prognostic mai puțin favorabil nu este un verdict: el ajută medicul hematolog să aleagă momentul și tipul tratamentului. La consultație îți explicăm ce înseamnă rezultatul în cazul tău.

Ce nu poate detecta

• schimbările din interiorul genei TP53 (mutațiile) fără deleție 17p, care, conform ERIC, sunt mai frecvente decât deleția 17p singură; ele se caută prin secvențiere;
• starea genelor de anticorpi din celulele leucemiei (statutul mutațional IGHV), analizată printr-un test separat (HT-0179);
• cariotipul complex și alte modificări ale cromozomilor din afara regiunilor analizate;
• partenerul translocației IGH, dacă sonda arată doar ruperea regiunii (sondă de tip separare);
• modificările prezente doar într-un grup prea mic de celule (clonă), sub pragul de detecție al metodei.

Cum se face

Testul se face pe sânge periferic sau pe măduvă osoasă, recoltate pe heparină de litiu, ori pe celule fixate sau lame necolorate. În LLC, proba obișnuită este sângele venos; aspiratul de măduvă îl recoltează medicul hematolog, prin puncție medulară, când este nevoie. Rezultatul vine, de obicei, în 11 zile lucrătoare de la primirea probei în laborator. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• Variante raportate: deleția 13q (13q-); deleția 11q (11q-); deleția 17p (17p-); trisomia 12 (+12); translocații care implică locusul IGH (lanțul greu al imunoglobulinelor)
• Probă: sânge periferic recoltat pe heparină de litiu (cel puțin 3 ml), măduvă osoasă recoltată pe heparină de litiu (cel puțin 1 ml), suspensie de celule fixate (un tub pentru fiecare cultură) sau lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă)
• Durată: 11 zile lucrătoare

Context clinic

• Sonda IGH ajută la diagnosticul diferențial al LLC cu alte limfoame cu celule B, în primul rând cu limfomul cu celule de manta, cu t(11;14).