Detecția prin FISH a translocației t(8;21) RUNX1/RUNX1T1

Pe scurt

Testul caută, printr-o analiză la microscop cu sonde fluorescente (FISH), translocația t(8;21), care unește gena RUNX1 de pe cromozomul 21 cu gena RUNX1T1 de pe cromozomul 8. Această fuziune definește un tip de leucemie acută mieloidă (LAM) din grupul numit „core binding factor”, cu evoluție probabilă (prognostic) și urmărire proprii. Se face de obicei dintr-o probă de măduvă osoasă, dar se poate face și din sânge, la indicația medicului hematolog.

Ce analizează

Cromozomii sunt „volumele” în care stau genele. Într-o translocație, doi cromozomi își schimbă între ei câte un fragment. În t(8;21), gena RUNX1, care controlează formarea celulelor sângelui, se lipește de gena RUNX1T1, iar gena nouă, RUNX1::RUNX1T1, blochează maturarea celulelor tinere din măduvă.

Testul folosește mici fragmente de ADN marcate cu o culoare fluorescentă (sonde), care se atașează de cele două gene; metoda se numește hibridizare fluorescentă in situ (FISH). La microscop, în nucleele celulelor din probă, specialistul vede dacă cele două gene au ajuns una lângă alta, adică dacă s-a produs fuziunea. Analiza se face pe nuclee, așa că nu are nevoie de celule care se divid în cultură, ca la cariotip.

Conform MedlinePlus Genetics, LAM de tip „core binding factor” reprezintă 12–15% din LAM la adulți, iar t(8;21) este translocația cea mai frecventă din acest grup.

Pentru cine este

• persoană cu leucemie acută mieloidă nou diagnosticată, pentru încadrarea genetică a bolii;
• persoană cu LAM la care cariotipul din măduvă nu a reușit sau nu a fost concludent;
• persoană cu un număr crescut de celule tinere (blaști) în măduvă, dar sub pragul obișnuit de leucemie, la care medicul vrea să excludă o leucemie definită genetic;
• reevaluarea unei probe, la cererea medicului hematolog, după un diagnostic pus anterior.

Cu un termen de 9 zile lucrătoare, testul nu ține locul analizelor genetice rapide din spital, iar momentul începerii tratamentului îl stabilește medicul hematolog, fără să aștepte acest rezultat.

Ce poate arăta rezultatul

• Pozitiv: fuziunea RUNX1::RUNX1T1 apare într-o parte dintre nucleele analizate, peste pragul laboratorului. Conform clasificării ELN din 2022, LAM cu t(8;21) intră în grupa de risc genetic favorabil. Tratamentul îl stabilește medicul hematolog, care ia în calcul și celelalte rezultate.
• Negativ: fuziunea nu s-a văzut în nucleele analizate. LAM poate avea alte modificări, care se caută prin cariotip, prin alte sonde FISH sau prin secvențiere.
• Neconcludent: proba nu a avut destule celule sau semnalele nu au putut fi citite; se poate cere o probă nouă.

Spre deosebire de secvențiere, FISH nu raportează variante de semnificație incertă. La consultație îți explicăm ce înseamnă rezultatul pentru tine și ce întrebări merită să discuți cu medicul hematolog.

Ce nu poate detecta

• celulele leucemice puține rămase după tratament (boala reziduală măsurabilă); conform ELN 2022, ele se urmăresc prin PCR cantitativ;
• schimbările din interiorul genelor (mutațiile), de exemplu KIT, FLT3 sau NPM1, care se caută prin secvențiere;
• alte translocații sau pierderi de cromozomi, în afara regiunilor RUNX1 și RUNX1T1;
• unele forme rare, cu rearanjări complexe, care pot da un tipar de semnale greu de interpretat;
• celulele bolnave sub pragul de detecție al metodei.

Cum se face

Testul se face pe măduvă osoasă sau pe sânge periferic, recoltate pe heparină de litiu; se pot trimite și celule fixate, lame necolorate sau țesut inclus în parafină (FFPE). În leucemia acută mieloidă, proba obișnuită este aspiratul de măduvă, recoltat de medicul hematolog prin puncție medulară; la consultație îți explicăm cum se trimite. Rezultatul vine, de obicei, în 9 zile lucrătoare de la primirea probei în laborator. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• Variante raportate: translocația t(8;21) dintre genele RUNX1 și RUNX1T1
• Probă: sânge periferic recoltat pe heparină de litiu (cel puțin 3 ml), măduvă osoasă recoltată pe heparină de litiu (cel puțin 1 ml), suspensie de celule fixate (un tub pentru fiecare cultură), lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă) sau țesut fixat în formol și inclus în parafină (FFPE; bloc sau 4–6 secțiuni)
• Durată: 9 zile lucrătoare