Panel FISH pentru leucemie mieloidă acută

Pe scurt

Panelul caută, printr-o analiză la microscop cu sonde fluorescente (FISH), șapte modificări ale cromozomilor importante în leucemia acută mieloidă (LAM). Unele definesc tipuri de LAM cu tratament și evoluție probabilă (prognostic) proprii, altele încadrează boala într-o grupă de risc. Rezultatul completează cariotipul și analizele moleculare; se face de obicei dintr-o probă de măduvă osoasă, la indicația medicului hematolog.

Ce analizează

În LAM, celulele tinere din măduvă (blaștii) se înmulțesc fără să se maturizeze. Modificările cromozomilor din aceste celule ajută la încadrarea bolii. Testul folosește mici fragmente de ADN marcate cu o culoare fluorescentă (sonde), care se atașează de regiuni precise; metoda se numește hibridizare fluorescentă in situ (FISH). La microscop se văd culori lipite una de alta (o fuziune), separate (o rupere) sau lipsă (o pierdere). Panelul are șapte sonde:

• t(15;17), PML::RARA: leucemia acută promielocitară;
• inv(16), cu gena CBFB: LAM de tip „core binding factor”;
• t(8;21), RUNX1::RUNX1T1: tot LAM de tip „core binding factor”;
• KMT2A (11q23.3): rearanjările genei KMT2A, cu mulți parteneri posibili;
• MECOM (3q26.2): rearanjările genei MECOM, de exemplu inv(3) sau t(3;3);
• 5q: pierderea unei porțiuni din brațul lung al cromozomului 5;
• 7q: pierderea unei porțiuni din brațul lung al cromozomului 7, care apare și când lipsește întregul cromozom.

Pentru cine este

• persoană cu LAM nou diagnosticată, pentru încadrarea genetică a bolii, alături de cariotip;
• persoană cu LAM la care cariotipul din măduvă nu a reușit sau nu a fost concludent;
• persoană cu blaști crescuți în măduvă, sub pragul obișnuit de leucemie, la care medicul caută o modificare care definește singură boala;
• persoană cu un sindrom mielodisplazic care pare să evolueze spre leucemie.

Ce poate arăta rezultatul

• Fuziune PML::RARA: leucemie acută promielocitară, o urgență medicală; conform ELN, tratamentul începe la simpla suspiciune, fără să aștepte confirmarea genetică.
• t(8;21) sau inv(16): conform clasificării ELN din 2022, risc genetic favorabil.
• Rearanjare MECOM sau deleție 5q: în aceeași clasificare, risc nefavorabil.
• Rearanjare KMT2A: în aceeași clasificare, riscul depinde de partener: t(9;11) are risc intermediar, ceilalți parteneri, risc nefavorabil. Dacă sonda arată doar ruperea genei, partenerul se află prin cariotip sau teste moleculare.
• Pierderea regiunii 7q: poate fi o deleție 7q sau pierderea întregului cromozom 7, pe care sonda nu le deosebește întotdeauna. Pierderea întregului cromozom 7 are risc nefavorabil în clasificarea ELN din 2022. Conform clasificării OMS din 2022, ambele fac parte din modificările care definesc LAM cu modificări legate de mielodisplazie.
• Fără modificări în regiunile analizate sau neconcludent, când celulele au fost prea puține.

Planul de tratament îl stabilește medicul hematolog, din toate rezultatele. La consultație îți explicăm ce înseamnă rezultatul în cazul tău.

Ce nu poate detecta

• schimbările din interiorul genelor (mutațiile), de exemplu NPM1, FLT3, CEBPA sau TP53, care se caută prin secvențiere și contează mult pentru încadrarea riscului;
• fuziunea BCR::ABL1, t(6;9) și alte modificări rare, care au nevoie de alte sonde;
• cariotipul complex (trei sau mai multe modificări), care se evaluează prin cariotip;
• partenerul exact al genelor KMT2A și MECOM, când sonda arată doar ruperea;
• celulele leucemice puține rămase după tratament (boala reziduală măsurabilă), care se urmăresc prin PCR cantitativ sau prin alte metode mai sensibile.

Cum se face

Testul se face pe măduvă osoasă sau pe sânge periferic, recoltate pe heparină de litiu, ori pe celule fixate sau lame necolorate. În LAM, proba obișnuită este măduva extrasă cu un ac (aspiratul de măduvă); la consultație îți explicăm cum se trimite. Rezultatul vine, de obicei, în 11 zile lucrătoare de la primirea probei în laborator. Consultațiile de genetică medicală dinainte și de după test și interpretarea rezultatului sunt incluse în preț.

Pentru medici

• Metodă: hibridizare fluorescentă in situ (FISH)
• Variante raportate: translocația t(15;17); inversiunea inv(16); translocația t(8;21); rearanjamente ale genei KMT2A (regiunea 11q23.3); deleția brațului lung al cromozomului 5 (5q-); deleția brațului lung al cromozomului 7 (7q-); rearanjamente ale genei MECOM (inversiuni sau translocații ale cromozomului 3)
• Probă: sânge periferic recoltat pe heparină de litiu (cel puțin 3 ml), măduvă osoasă recoltată pe heparină de litiu (cel puțin 1 ml), suspensie de celule fixate (un tub pentru fiecare cultură) sau lame citogenetice necolorate (2 lame pentru fiecare sondă)
• Durată: 11 zile lucrătoare